연구과제공모
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Information Center for Agriculture and Life Sciences
농업생명과학정보원은 광범위한 농업생명과학분야의 국내외 전문연구정보를 체계적으로 수집, 분석, 가공하여 DB로 구축하고 있고,
대량 생산되는 연구실적들을 정보화하여 온라인으로 유통시킴으로 연구자들이 효율적으로 관련 정보를 얻도록 돕고 있습니다.
원스텝 CRISPR/Cas9-Replicon 벡터 구축을 위한 toolbox 개발 및 기능성 유전자 벡터 제작
1. 용역명 : 원스텝 CRISPR/Cas9-Replicon 벡터 구축을 위한 toolbox 개발 및 기능성 유전자 벡터 제작
2. 용역수행기간 : 계약일로부터 2022년 11월 30일까지
3. 용역금액 : 59,807,000원
4. 과업범위
◦ 공시재료: 현사시나무
◦ Pre-Assembled CRISPR/Cas9-Replicon Vector(PAC-RV) 구축
- 기존의 7개 벡터를 이용하는 골든게이트 클로닝의 비효율성 및 어려움을 극복하고자 손쉽게 원스텝으로 Replicon 벡터에 클로닝을 완성하기 위한 PAC-RV 구축 시스템 설계
- PAC-RV 범용성을 위해 3종류의 항생제 마커(kanamycin, hygromycin, basta) 활용이 가능하도록 3종류의 PAC-RV 구축(PAC-RVk, PAC-RVh,PAC-RVb): 3종
◦ 다중 타겟 gRNA의 원스텝 PAC-RV 클로닝 toolbox 개발
- 다중 gRNA 올리고머(20 nt)를 이용한 원스텝 클로닝 toolbox 개발 및 최적화 시스템: 1종
- 다중 gRNA 벡터를 이용한 원스텝 클로닝 toolbox 개발 및 최적화 시스템: 1종
- Assembled CRISPR/Cas9-Replicon Vector(AC-RV) 개발: 3종
◦ Assembled CRISPR/Cas9-Replicon Vector(AC-RV)의 세포 내 도입 및 및 작동성 검증
- 수형 조절 유전자인 TAC1을 타겟으로 AC-RV 제작 및 포플러 세포 내 도입
- 표적 염기서열 변이율 분석
- 재분화 개체 선발: 20건
- Replicon 및 T-DNA 없는 개체 선발: 5건
◦ AC-RV 활용을 위한 기능성 후보 유전자 발굴 및 AC-RV 벡터 제작
- 임목의 생장 및 재질 조절 관련 후보 유전자 발굴: 4종
- 후보 유전자를 도입한 AC-RV 벡터 제작: 4종
